GB 4789.3 大腸菌群的檢測適用方法解讀及注意事項匯總
GB/T 4789.3-2003 大腸菌群測定
03版只有(you)一個方法(fa)：MPN法(fa)，也有(you)人(ren)叫(jiao)九(jiu)管法(fa)。
陽性的方法步驟(zou)：
制樣→接種到乳(ru)糖膽(dan)鹽發(fa)酵(jiao)管→伊紅美藍培養基(ji)→乳(ru)糖發(fa)酵(jiao)管（同時(shi)做革(ge)蘭氏染色）→看表(biao)計算。
其實(shi)這個方(fang)法比較(jiao)簡單的(de)一個方(fang)法，也是常說的(de)半定量的(de)方(fang)法。
我(wo)們下面說一下這個方(fang)法的注意事項。
第一，這個方(fang)法是一個半定量的方(fang)法，最不好要用于測量審核上。
第二，做實驗前要注意導管里是(shi)否有空氣（最好使(shi)用大直徑(jing)的(de)小(xiao)導管），以免影響結果的(de)判斷，增加工作(zuo)量。
第三，經(jing)常有(you)人會無視標(biao)準(zhun)有(you)一個糞大腸的檢測步驟。這個很(hen)少(shao)人會去做。
第四，對伊紅美藍的陽性(xing)(xing)現象不(bu)了解（其(qi)實實驗室(shi)可(ke)以(yi)在(zai)做(zuo)出陽性(xing)(xing)結果之后，將菌接出來(lai)，以(yi)后用(yong)來(lai)做(zuo)人員培訓）。
第五，對標準(zhun)是(shi)否還在(zai)實行(xing)不清楚，很多(duo)人在(zai)16版出(chu)來(lai)的時候，都在(zai)問03版是(shi)不是(shi)也作廢(fei)了，其實并(bing)沒有(you)。03版目前(qian)還在(zai)執行(xing)著（畢(bi)竟(jing)還有(you)些標準(zhun)還在(zai)用著它的單位）。
GB 4789.3-2016 大腸菌群計數
這個標(biao)準里(li)有兩(liang)個方法：MPN法和平(ping)板計算。
首先(xian)說MPN法，它(ta)相(xiang)對(dui)于03版(ban)的(de)MPN有一定的(de)區別。第(di)(di)一這(zhe)兩個(ge)方法用的(de)培(pei)養基完全不一樣。第(di)(di)二(er)16版(ban)的(de)方法沒有伊紅美藍畫線(xian)，這(zhe)樣的(de)過程減少了(le)一步相(xiang)對(dui)簡單一點。第(di)(di)三單位(wei)變了(le)。
平板(ban)法：其實平板(ban)是(shi)我們(men)目(mu)前用得最多的一(yi)個(ge)方法，步(bu)驟看標準的實驗流程圖。
那么平板法有什么注意的(de)呢？
第一，做平板法的(de)時候需(xu)要覆(fu)蓋(gai)第二層培養(yang)基，它(ta)的(de)作用是：有助于典型(xing)菌落形成也為了防止蔓延性細菌生長(chang)。
第二，挑菌，其實這(zhe)一(yi)步主要(yao)怕挑菌的(de)時候挑不(bu)到(dao)菌，其實你可以(yi)把帶菌的(de)部分(fen)培(pei)養(yang)基(ji)(ji)完(wan)全(quan)挑起來(lai)(lai)（不(bu)要(yao)怕培(pei)養(yang)基(ji)(ji)包含著它出不(bu)來(lai)(lai)）放到(dao)BGLB內(nei)，然后用手腕力搖(yao)一(yi)下試(shi)管就可以(yi)把培(pei)養(yang)基(ji)(ji)打(da)碎。
第三，計(ji)算(suan)問題，標(biao)準(zhun)挑(tiao)取10個典型菌(jun)落。然(ran)(ran)后計(ji)算(suan)比例再乘以(yi)所(suo)(suo)有典型菌(jun)落的數（有人(ren)(ren)會(hui)在這里糾(jiu)結，覺得不太準(zhun)確，應(ying)該所(suo)(suo)有菌(jun)落都挑(tiao)取）其實(shi)這個一(yi)個想法很好，但(dan)是這樣之后增加工作量的同時影響(xiang)效率。其實(shi)在平(ping)板上你應(ying)該區分典型菌(jun)落出來去做(zuo)就可(ke)以(yi)（當然(ran)(ran)這步要考驗(yan)一(yi)個人(ren)(ren)的眼(yan)力和(he)經驗(yan)）初學者可(ke)以(yi)根(gen)據(ju)形態(tai)進行(xing)分類，然(ran)(ran)后以(yi)形態(tai)特(te)征進行(xing)驗(yan)證。
兩個版本的一些檢測方法和注意事項都說了，那么我們說一下一些朋友常問的一些問題。
1. 03版(ban)(ban)的結果(guo)能不能和(he)10版(ban)(ban)的結果(guo)進行換(huan)算和(he)比較(jiao)。
答(da)：其實換算是(shi)(shi)不(bu)行(xing)的(de)，這個兩(liang)個不(bu)同的(de)標準(zhun)。如(ru)果(guo)只是(shi)(shi)進(jin)行(xing)比較兩(liang)個結果(guo)是(shi)(shi)可以的(de)，但是(shi)(shi)不(bu)建(jian)議。
2.如何選擇(ze)檢測方法(fa)？
答(da)：你(ni)要(yao)根據(ju)產品的執行標(biao)準去選擇檢測方(fang)法，不(bu)是(shi)說(shuo)你(ni)喜歡那種(zhong)就可以用那種(zhong)。
3、同一(yi)批產(chan)品，檢測的兩份(fen)結果不一(yi)樣(yang)，是(shi)不是(shi)那里出問題？
答：其實(shi)不是出問題，這個是正常(chang)的，同(tong)一(yi)批產品(pin)不代表他(ta)們(men)的微生物檢測(ce)結(jie)果(guo)是一(yi)模一(yi)樣(yang)(yang)的，如果(guo)是這樣(yang)(yang)也沒必要(yao)做五份(fen)去驗證產品(pin)合(he)格了吧(ba)？如果(guo)說(shuo)同(tong)一(yi)份(fen)樣(yang)(yang)品(pin)（制成一(yi)份(fen)樣(yang)(yang)）出現結(jie)果(guo)差好遠的話，這里就要(yao)去分析那里出問題。
好像就這些問題比較常見。
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