微(wei)(wei)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)體(ti)積很小，測定個體(ti)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)長很困難，也沒有太大意義。通常微(wei)(wei)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)的(de)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)長是指(zhi)群(qun)體(ti)的(de)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)長，微(wei)(wei)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)長量(liang)是指(zhi)在一(yi)定條件下微(wei)(wei)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)經(jing)過培(pei)養后群(qun)體(ti)的(de)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)長量(liang)。
測(ce)定生長量(liang)(liang)的方法有許多種，可以直接(jie)測(ce)量(liang)(liang)培養物的體積或質量(liang)(liang)，也(ye)可以通過(guo)測(ce)量(liang)(liang)細胞組分含量(liang)(liang)或濁(zhuo)度等指標來間接(jie)獲得微生物的量(liang)(liang)。
(一)直(zhi)接法
1.測(ce)體積
它是一種較為粗(cu)放的(de)方法，通常用于初步的(de)測定。
操作(zuo)方法(fa)如(ru)下：將待(dai)測培養(yang)液放在刻度離(li)心(xin)管中作(zuo)自然(ran)沉(chen)降或(huo)進行(xing)一定(ding)時間的離(li)心(xin)，然(ran)后觀察(cha)沉(chen)降物的體積。
2.稱干(gan)重
采用離心法或過濾法測(ce)定，一般干重為濕重的10%-20%,一個(ge)細菌一般重10-12
~10-13g。
離心(xin)法(fa)：將待測培養液離心(xin)，再用清水(shui)洗(xi)滌離心(xin)1~5次后干燥(zao)(zao)，可用105℃、100℃或紅外(wai)線烘干，也(ye)可在較(jiao)低(di)的溫度(-80℃或-40℃)下進行真(zhen)空干燥(zao)(zao)，然后稱干重。
過濾法：如為(wei)絲狀(zhuang)真(zhen)菌(jun)可(ke)用濾紙過濾，如為(wei)細(xi)(xi)菌(jun)可(ke)用乙酸纖維膜(mo)等(deng)濾膜(mo)進行過濾。過濾后，細(xi)(xi)胞可(ke)用少量(liang)水洗滌，再(zai)真(zhen)空干燥(-40℃以下(xia)),稱干重(zhong)。一般在(zai)液(ye)體培養(yang)基(ji)中(zhong)，細(xi)(xi)菌(jun)的濃度(du)的數量(liang)級大(da)約為(wei)108CFU/mL, 100 mL培養(yang)物可(ke)獲(huo)得(de)10 mg ~300 mg干重(zhong)的細(xi)(xi)菌(jun)。
(二)間接法
1.代(dai)謝(xie)指標(biao)法
微生物(wu)生長過程中伴(ban)隨著(zhu)的物(wu)質合成與利用(yong)，因(yin)此很(hen)多代謝指標與細菌生長量(liang)相(xiang)關，這些(xie)指標可用(yong)作(zuo)生長測定的相(xiang)對值。
大(da)多(duo)數細菌(jun)的(de)(de)含氮(dan)量(liang)(liang)約為(wei)(wei)(wei)干(gan)重的(de)(de)12.5% ,酵母菌(jun)約為(wei)(wei)(wei)7.5% ,霉菌(jun)約為(wei)(wei)(wei)6.0%.總氮(dan)在細胞粗蛋(dan)白中的(de)(de)含量(liang)(liang)也較為(wei)(wei)(wei)穩定(ding)。因此，培養物(wu)含氮(dan)量(liang)(liang)可以近似反應生長量(liang)(liang)。含氮(dan)量(liang)(liang)的(de)(de)測定(ding)方法(fa)有(you)很多(duo)，常用凱氏定(ding)氮(dan)法(fa)。此法(fa)適用于(yu)細胞濃(nong)度較高的(de)(de)樣品，操作過程較繁鎖(suo)。
微生(sheng)物(wu)新陳(chen)代(dai)謝過程中(zhong)離不開碳(tan)(tan)元(yuan)素。測定培(pei)養物(wu)含碳(tan)(tan)量(liang)的方法如(ru)下(xia)：將培(pei)養物(wu)混入1ml水或無機緩沖液中(zhong)，用2 mL2%重(zhong)鉻酸鉀溶液在(zai)100 ℃下(xia)加熱30 min,冷卻后，加水稀釋至5 mL,在(zai)580 nm波(bo)長下(xia)測定光密度值(用試劑(ji)作空(kong)白對照，并用標(biao)準樣(yang)品作標(biao)準曲線),即可推算出生(sheng)長量(liang)。
微(wei)生物細胞內(nei)的其他成分，如磷、DNA、RNA、ATP和N-乙酰胞壁酸等的含量，以及產(chan)酸、產(chan)氣、產(chan)二氧化碳(用標(biao)記葡萄糖(tang)作基質)、耗氧、黏度(du)和產(chan)熱等指標(biao)，也都(dou)可以用于生長量的測(ce)定。
2.比濁法
微(wei)生(sheng)物(wu)在液體(ti)培養基中生(sheng)長，由于個體(ti)體(ti)積(ji)和細(xi)胞數量(liang)的(de)增加，引起培養物(wu)混濁度的(de)增高。通過測定培養物(wu)的(de)濁度可以近似推斷(duan)其生(sheng)長量(liang)。
比(bi)濁法(fa)通(tong)常采用McFarland比(bi)濁管(guan)，用不同濃度(du)(du)的(de)氯化鋇(bei)與稀硫(liu)(liu)酸配制(zhi)成(cheng)的(de)10支試管(guan)，其中(zhong)形成(cheng)的(de)硫(liu)(liu)酸鋇(bei)有10個濃度(du)(du)梯(ti)度(du)(du)，分(fen)別對(dui)應10個相(xiang)對(dui)的(de)細(xi)菌(jun)濃度(du)(du)(預(yu)先(xian)用相(xiang)應的(de)細(xi)菌(jun)測(ce)定(ding))。某(mou)一(yi)(yi)未知濃度(du)(du)的(de)菌(jun)液(ye)在(zai)透射光下(xia)用肉眼與某(mou)一(yi)(yi)比(bi)濁管(guan)進行比(bi)較(jiao)，如果兩者的(de)濁度(du)(du)相(xiang)當，即可目測(ce)出(chu)該(gai)菌(jun)液(ye)的(de)大(da)致濃度(du)(du)。如要(yao)精確測(ce)定(ding)培養物的(de)濁度(du)(du)，則需(xu)要(yao)用分(fen)光光度(du)(du)計進行。在(zai)可見光的(de)450 nm -650 nm波(bo)長內均可測(ce)定(ding)。
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