一、分(fen)類及(ji)危(wei)害
黃(huang)曲(qu)霉毒(du)素(AFT)是(shi)和等某(mou)些菌株產生的(de)雙呋喃環類毒素。其衍生物有約20種(zhong),分別命名(ming)為B1、B2、G1、G2、M1、M2、GM、P1、Q1、毒(du)醇等。其中(zhong)(zhong)以B1的(de)(de)毒(du)性(xing)最(zui)大,致(zhi)癌性(xing)最(zui)強。動物食用黃曲(qu)霉(mei)(mei)(mei)毒(du)素污染的(de)(de)飼料后(hou),在肝、腎、肌肉(rou)、血、奶(nai)及蛋中(zhong)(zhong)可(ke)測出極微量(liang)的(de)(de)毒(du)素。黃曲(qu)霉(mei)(mei)(mei)毒(du)素及其產生菌(jun)在自然界中(zhong)(zhong)分布廣泛(fan),有些(xie)菌(jun)株(zhu)產生不止一種(zhong)類(lei)型的(de)(de)黃曲(qu)霉(mei)(mei)(mei)毒(du)素,在黃曲(qu)霉(mei)(mei)(mei)中(zhong)(zhong)也有不產生任何類(lei)型黃曲(qu)霉(mei)(mei)(mei)毒(du)素的(de)(de)菌(jun)株(zhu)。黃曲(qu)霉(mei)(mei)(mei)毒(du)素主要污染糧油及其制品(pin),各(ge)種(zhong)植物性(xing)與動物性(xing)食品(pin)也能被(bei)污染。
黃曲(qu)霉毒素是黃曲(qu)霉、寄生曲(qu)霉等產生的代謝產物.當糧(liang)食未能及時(shi)(shi)曬干及儲藏不當時(shi)(shi) ,往往容易被黃曲(qu)霉或寄生曲(qu)霉污染專而(er)產生此類毒素.霉變的花生、玉(yu)米(mi),大米(mi)、小麥、豆屬類、堅果(guo)類、肉類、乳及乳制品、水(shui)產品等均有.其(qi)中以(yi)花生和玉米(mi)污染(ran)最嚴(yan)重.
薄層(ceng)色譜法(TLC)
TLC法(fa)是(shi)(shi)測(ce)(ce)(ce)定黃(huang)曲霉毒素的經典(dian)方法(fa),是(shi)(shi)中國測(ce)(ce)(ce)定食品(pin)及飼(si)料中AFT黃(huang)曲霉素B1(AFB1)的標準方法(fa)之(zhi)一(GB/T5009.23-2006)。其原理是(shi)(shi)針對不同的樣(yang)品(pin),用適宜的提(ti)取溶劑(ji)將AFB1從樣(yang)品(pin)中提(ti)取出來,經溶劑(ji)萃取純化,再(zai)在薄層(ceng)板上層(ceng)析展開(kai),分離,利(li)用AFB1的熒光(guang)特性,根據熒光(guang)斑點(dian)的大小和強弱,比(bi)較測(ce)(ce)(ce)定黃(huang)曲霉毒素含量。
TLC有(you)單項展(zhan)(zhan)開(kai)法(fa)(fa)和(he)(he)雙向展(zhan)(zhan)開(kai)法(fa)(fa),TLC法(fa)(fa)由于設備簡單,易于普(pu)及,所以國內外仍在使(shi)用,但(dan)由于該法(fa)(fa)樣品前處(chu)理(li)繁(fan)瑣(suo),且(qie)提取和(he)(he)凈(jing)化效果不(bu)夠理(li)想,提取液中雜(za)質(zhi)較多因而在展(zhan)(zhan)開(kai)時影響斑點的熒(ying)光強度(du),而雙向展(zhan)(zhan)開(kai)雖(sui)避免了(le)雜(za)質(zhi)干擾(rao),增(zeng)加了(le)靈(ling)敏度(du),但(dan)增(zeng)加了(le)操(cao)作步驟(zou)和(he)(he)時間。
液相色(se)譜法
對黃曲霉(mei)毒素B1、B2、G1、G2分(fen)(fen)別進行定量分(fen)(fen)析。其主(zhu)要是用(yong)(yong)熒光檢(jian)(jian)測(ce)器檢(jian)(jian)測(ce),在適(shi)宜的流動(dong)相條(tiao)件(jian)下,采用(yong)(yong)反相C18柱(zhu),使多種黃(huang)曲(qu)霉(mei)毒素同時(shi)分(fen)(fen)離(li)。黃(huang)曲(qu)霉(mei)毒素免疫(yi)親(qin)和柱(zhu)HPLC法采用(yong)(yong)單克(ke)隆(long)抗體(ti)免疫(yi)技術,可(ke)(ke)以(yi)特效(xiao)地將黃(huang)曲(qu)霉(mei)毒素與其他真菌(jun)素分(fen)(fen)離(li)出來,分(fen)(fen)離(li)效(xiao)率和回收率高(gao)。此(ci)方法已得到廣泛(fan)應用(yong)(yong),并被美國官方分(fen)(fen)析化學家協會(hui)(AOAC)確認為官方檢(jian)(jian)測(ce)方法。該方法的檢(jian)(jian)測(ce)限可(ke)(ke)達0.02~5ppb。
酶聯免疫法(ELISA)
檢測AFB1的理論基礎是,其采用(yong)單克(ke)(ke)隆或多克(ke)(ke)隆抗體(ti)技(ji)術(shu),具有特異性強、分析時(shi)間短等優點。其原(yuan)理是抗原(yuan)(或抗體(ti))吸附于載體(ti)上的免疫(yi)吸附劑和用(yong)酶標抗體(ti)(或抗原(yuan))與標本中的待(dai)測(ce)物(抗原(yuan)或抗體(ti))起特異的免疫(yi)學反應(ying),最后用(yong)測(ce)定(ding)酶活力(li)的方(fang)法來增加測(ce)定(ding)的敏(min)感度。大體(ti)分為2類:一是(shi)用(yong)雙(shuang)抗(kang)體夾心法(fa)檢測樣本中的AFTB1, 二是(shi)用(yong)競(jing)爭法(fa)檢測樣本中的AFTB1,。為了(le)使用(yong)方便(bian),國內外已研制了(le)酶標記免疫吸附測定試劑(ji)盒及配套儀器,方法(fa)也被列入國家標準(zhun)(GB/T5009.22 1996第(di)二法(fa))。
但由(you)于(yu)ELISA法(fa)中(zhong)酶的(de)活性易受(shou)反(fan)應條件影響(xiang),因此ELISA法(fa)測定結果穩定性較差(cha),分析結果的(de)準確(que)性不(bu)高,容易出現(xian)假陽性結果。
液(ye)相色譜(pu)(pu)串聯質譜(pu)(pu)法
一般來說,組(zu)織中(zhong)黃曲霉(mei)毒(du)素(su)含量很低(di),而(er)液相色譜(pu)串聯(lian)質譜(pu)法(fa)具有比高效色譜(pu)法(fa)更高的靈敏度和準確性,如今這種方法(fa)還極(ji)少使用在測(ce)定組(zu)織霉(mei)菌毒(du)素(su)含量中(zhong)。該方法(fa)檢測(ce)限可達(da)0.02~0.025 ppb。84%甲醇水溶液(ye)提取樣品中,正(zheng)己烷脫脂,HLB固相(xiang)萃取柱凈化(hua)。采用電(dian)噴霧電(dian)離(li),正(zheng)離(li)子掃描,選擇(ze)多反應檢測(ce)模式(MRM)監測(ce),外標法定量,該法靈敏,結果可靠。
三、食品的防霉去毒措施
吉(ji)林大學軍需(xu)科技學院(yuan)食(shi)品(pin)質量安(an)全專業教授徐克成介紹,顆粒狀(zhuang)的(de)被污染糧(liang)食(shi)可通過(guo)晾(liang)曬、清洗消(xiao)除(chu)部分黃(huang)曲霉,但如果是粉末狀(zhuang)的(de)食(shi)物或(huo)飼料,則(ze)很(hen)難(nan)通過(guo)以上方法(fa)清除(chu)。
(1)防(fang)霉:控制(zhi)糧食含水量在12~13%以下即(ji)可防(fang)霉。保持(chi)米粒及(ji)花生外殼的完整,使用(yong)化(hua)學熏蒸劑,對防(fang)止霉菌侵染也有一定作用(yong)。
(2)去毒(du)方(fang)法:挑(tiao)(tiao)除(chu)霉(mei)粒(li):適用(yong)花生。因(yin)黃(huang)曲霉(mei)素(su)主要(yao)存(cun)在(zai)于發(fa)霉(mei),變色,破損及(ji)(ji)皺縮的花生中,挑(tiao)(tiao)除(chu)后,可使黃(huang)曲霉(mei)毒(du)素(su)含量顯著(zhu)降低。碾軋加(jia)工(gong)及(ji)(ji)加(jia)水搓洗:適應(ying)于大米(mi),因(yin)毒(du)素(su)主要(yao)存(cun)在(zai)于米(mi)糠及(ji)(ji)大米(mi)表層。脫(tuo)胚(pei)去毒(du):適用(yong)于玉米(mi)。脫(tuo)胚(pei)法有(you)兩種:一是浮(fu)選,將(jiang)玉米(mi)碾3MM左右的碎粒(li)。加(jia)入(ru)清水,攪拌,輕搓,胚(pei)部(bu)碎片輕而上(shang)浮(fu),撈出浮(fu)層;二(er)是碾軋法,將(jiang)玉米(mi)碾軋,去掉外皮及(ji)(ji)胚(pei)部(bu).
(3)加(jia)強(qiang)食品衛生監測。
(4)加堿破壞毒素:適用于食用油.
(5)其他:如紫外線照射,鹽炒法等有一定去毒效果。
我(wo)公司服務內(nei)容:
檢測(ce)品類:食用油(you)、油(you)脂(zhi)及其制品、玉米、大豆、谷(gu)物(wu)、牛(niu)乳及其制品等。
檢測項目:黃曲(qu)霉毒素B1、黃曲霉毒素B2、黃曲(qu)霉毒素(su)G1、黃曲(qu)霉毒素G2、黃曲(qu)霉毒素M1。
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